利用酶标仪改进医学检验专业实验教学

本文是一篇医学检验论文范文,关于医学检验相关毕业论文格式范文,关于利用酶标仪改进医学检验专业实验教学相关电大毕业论文范文。适合医学检验及实验教学及自动化方面的的大学硕士和本科毕业论文以及医学检验相关开题报告范文和职称论文写作参考文献资料下载。

【摘 要】本文对以酶标仪替代分光光度计,改进医学检验实验教学进行探讨,为酶标仪法在实验教学中的应用提供参考.

【关 键 词】酶标仪；医学检验；实验；教学

UseMicroplateReadertoImproveExperimentalTeachingofMedicalLaboratory

LIJiang-binXUJin-binWANGXinCHENFo-lan

（SchoolofMedicalLaboratory,GuangdongMedicalCollege,DongguanGuangdong523808）

【Abstract】Usemicroplatereadertoreplacespectrophotometer,improveexperimentalteachingofmedicallaboratoryandprovideareferenceforthemicroplatemethodinexperimentalteaching.

【Keywords】Microplatereader；Medicallaboratory；Experiment；Teaching

1医学检验实验教学现状

1.1分光光度计检测方法

目前大部分的医学院校所开设的医学检验实验课程,在进行比色测定时普遍采用紫外-可见分光光度计作为检测仪器.分光光度计之所以受到广泛的使用主要有几个原因：①分光光度计检测原理简单,易于学生理解,而且是其它自动化分析仪的原理基础；②分光光度计相比其它仪器价格更便宜,适合在大多数实验室广泛使用；③分光光度计检测结果相对准确,能满足大部分教学实验的需要[1].

1.2分光光度计检测方法的不足

虽然分光光度计作为教学实验室的常规检测仪器已经使用多年,然而,对于现今大部分临床实验室逐步实现半自动化乃至全自动化的趋势,传统的手工分光光度计检测方法已呈现出落后趋势,对实验项目进行批量化、快速、准确检测不单是临床实验室的要求,也是高等医学院校实验教学的要求.总结而言,运用手工分光光度计进行比色检测存在以下几个问题：

（1）耗时问题检测前需要对每台分光光度计进行开机预热.检测中,由于仪器设备不足,学生需要进行轮流检测,大部分时间花费在等待检测的过程中.另外,每位学生在进行检测时均需要对比色杯进行清洗,仪器读数反应慢等问题均导致实验时间拖拉,最终导致教学效率的下降.

（2）耗试剂问题目前,国内分光光度计所采用的标准玻璃比色杯的光径规格是1cm,要能够正确进行比色,比色杯所需添加试剂量约为3ml,加之检测前的比色杯润洗,以及检测过程的损耗,每个检测管所需试剂为4ml左右.部分院校实验室为了节省实际消耗,采用光径为0.5cm的玻璃比色杯,即使如此,每个检测管所需试剂量至少也要3ml,每次检测一般最少需要测定空白管、标准管、测定管等3支管,每名学生的实际消耗量至少要9ml,若每次实验以200名学生计算,则需要1800ml的试剂.而目前医学检验的许多检测项目均是采用标准化试剂盒作为试剂来源,每盒的容量一般在几十毫升到一百多毫升,这样算下来,仅购置试剂就是一笔不小的开支.同时使用更多是实际消耗,也导致废水处理和污染的压力增加.

（3）结果稳定性差获得一个较为满意的实验结果不仅是对课堂有关知识的验证,往往还可以提高学生对实验课程的兴趣,增加其自信力.分光光度计作为医学检验常规使用的检测仪器,其检测结果的准确性也备受关注,经过笔者对课堂教学实验观察,注意到几个方面可以影响分光光度计实验结果的准确性,如：在用酶法分别测定葡萄糖、甘油三酯、胆固醇等几个教学实验中,有部分学生由于不能按时对样品管进行检测,导致反应时间不一致而实验结果出现较大误差.还有例如在用双缩脲法测定蛋白质的实验中,学生之间的测定管颜色深浅不一,由于反应液极易吸附在比色杯壁,难以用蒸馏水洗干净,在比色测定时,实验结果极易受到前一位同学比色杯是否干净的影响,导致实验结果不稳定.

2酶标仪法改进医学检验实验教学

2.1酶标仪在实验教学中的应用及准确度探讨

酶标仪的基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同,近几年来,多功能酶标仪在国内各高校实验室逐渐推广开来.为了克服分光光度计在医学检验实验教学上的不足,笔者以酶标仪比色法分别测定葡萄糖、甘油三酯、胆固醇标准品为例,使用多功能酶标仪代替分光光度计,以96微孔板代替比色杯对实验中的标准管进行检测,探讨酶标仪比色法的可靠性[2].

2.1.1酶标仪比色法测定葡萄糖

实验方法：葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量.显色稳定性实验：葡萄糖终浓度为0.0ol/L的测定管在室温下放置0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h后分别用酶标仪比色法进行测定,并绘制时间-吸光值散点图,所得y等于-0.0096x+0.6496,R2等于0.9879,说明显色稳定,基本无颜色消退.线性实验：葡萄糖终浓度在0～0.264mmol/L范围内,用酶标仪比色法测定有良好的线性关系,放置2.5h时的样品浓度-吸光度作图所得线性关系为：y等于5.1612x+0.0822,R2等于0.9999.重复性实验：葡萄糖终浓度为0.0ol/L的测定管,3h内变异系数为CV等于0.016,说明酶标仪比色法测定葡萄糖的重复性非常好.

2.1.2酶标仪比色法测定甘油三酯

实验方法：磷酸甘油氧化酶法测定甘油三酯含量.显色稳定性实验：甘油三酯终浓度为0.022mmol/L的测定管在室温下放置0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h后用酶标仪比色法进行测定,并绘制时间-吸光值散点图,所得y等于-0.0073x+0.796,R2等于0.9932,说明显色稳定,基本无颜色消退.线性实验：甘油三酯终浓度在0～0.108mmol/L范围内,用酶标仪比色法测定有良好的线性关系,样品浓度-吸光度作图所得线性关系为：y等于6.2788x+0.1111,R2等于0.9989.重复性实验：甘油三酯终浓度为0.022mmol/L的测定管,3h内变异系数为CV等于0.037,说明酶标仪比色法测定甘油三酯的重复性非常好.2.1.3酶标仪比色法测定胆固醇

实验方法：胆固醇氧化酶法测定胆固醇含量.显色稳定性实验：胆固醇终浓度为0.051mmol/L的测定管在室温下放置0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h后用酶标仪比色法进行测定,并绘制时间-吸光值散点图,所得y等于-0.0059x+0.549,R2等于0.9967,说明显色稳定,基本无颜色消退.线性实验：胆固醇终浓度在0～0.25mmol/L范围内,用酶标仪比色法测定有良好的线性关系,样品浓度-吸光度作图所得线性关系为：y等于0.0391x+0.1116,R2等于0.9894.重复性实验：胆固醇终浓度为0.051mmol/L的测定管,3h内变异系数为CV等于0.019,说明酶标仪比色法测定胆固醇的重复性非常好.

2.2利用酶标仪改进教学实验的优势分析

2.2.1省时

用酶标仪改进比色法的教学实验具有快速读板的优点,读板速度（以96孔板为例）为11s,整个测定过程不需要1min,尤其是96孔板高通量的特点,一次读数相当于一台普通分光光度计24倍的工作量,这比起用传统分光光度计进行测定,可以大大缩短课堂实验时间,减少学生在实验中由于等待测定而浪费的时间,为学生进行课堂思考与讨论节省出时间.

2.2.2省试剂

现今高等医学院校在开设医学检验实验教学时,为了确保实验的可靠性,大部分已采用正规试剂盒,而改用酶标仪后,一次测定所需试剂量由原来的最低3ml减少为最多0.3ml,相差至少10倍,可以极大降低试剂成本.

2.2.3结果准确可靠

手工分光光度计检测重复性较差,误差较大,而酶标仪法具有非常好的重复性,测定结果可靠性是酶标仪法在实验教学应用上的保证,本文通过实验验证了酶标仪法检测结果稳定、线性好、重复性好,

2.2.4可以模拟自动化分析仪进行连续监测

值得注意的是,大部分酶标仪还可以设置温度控制,这对于酶类反应等需要保温的检测项目非常有利.例如在进行丙氨酸氨基转氨酶（ALT）活性测定时,以往由于实验教学主要采用手工分光光度计,分光光度计一般不带有恒温装置,这样就无法进行较为先进的连续监测法而只能使用准确性较差的终点法进行教学,而连续监测法的准确性高于终点法,因此在临床上,具备自动化分析仪的医院实验室基本都是采用连续监测法测定酶活性.使用了酶标仪后,利用其温度控制的功能,可以较为方便的采用连续监测法测定酶活性,提高教学与临床实际应用的契合度,使学生学习到更加先进的技术.

【参考文献】

[1]吴文铭.紫外可见分光光度计及其应用[J].生命科学仪器,2009,7（4）：61-63.

[2]刘新华.全自动酶联免疫分析系统的应用[J].中国医药导报,2006,3（20）：129-130.

[责任编辑：曹明明]

※基金项目：中华医学会医学教育分会、中国高等教育学会医学教育专业委员会医学教育研究课题（2012-SY-21）；广东省高等教育学会实验室管理专业委员会研究基金项目（GDJ2012073）；全国高等学校特色专业建设点――医学检验（TS10466）；广东省高等学校实验教学示范中心――医学检验（SJ1301）；广东省高等院校精品课程――临床生物化学及检验（XP1201）；广东医学院教育教学研究课题（JY1028）.

作者简介：李江滨（1975―）,男,硕士,副教授,主要从事医学专业教学与教育研究工作.